Commandée par les Rois Catholiques, située à côté de la Mosquée Mayor, sa construction qui commença au début du XVIème siècle fut initiée par Enrique Egas. Mais très vite Diego de Siloé continua les travaux et érigea ce qui est considéré comme une oeuvre maîtresse de la Renaissance espagnole. La façade principale est une superbe oeuvre baroque réalisée par Alonso Cano qui par ailleurs réalisa une tour du clocher des plus impressionnante. A l’intérieur les vitraux provenant de Flandres qui décorent les murs de la Chapelle Royale laissent passer une douce lumière qui illumine deux des principaux trésors de la Cathédrale: le Crucifix de Martínez Montañés de la Sacristía et sous ce crucifix est conservée un autre chef-d’œuvre de l'art espagnol : la Inmaculada, une petite sculpture baroque réalisée en 1656 par Alonso Cano.